一、實(shí)驗背景
結膜為一層富有血管的薄而透明的粘膜,覆蓋于眼瞼的內面和眼球的前面。按其所在部位分為瞼結膜,球結膜和結膜穹窿。結膜有助于防止異物和感染對眼球的損害,但結膜本身也會(huì )受到化學(xué)物質(zhì)或過(guò)敏物質(zhì)的刺激,或受到病毒、細菌的感染,出現眼痛、眼癢及充血。由于眼結膜*的韌性,類(lèi)似于纖維,手動(dòng)研磨通常難以研磨充分;為了提高科研工作者的實(shí)驗效率和研究進(jìn)度,本方法采用上海凈信多樣品組織研磨儀,對樣品進(jìn)行研磨處理,以便于實(shí)驗人員可以更好進(jìn)行后續實(shí)驗,如充分提取RNA、蛋白等。
二、研磨方法
1、實(shí)驗步驟:
a,準備好待研磨的眼結膜100毫克,干凈并滅菌的2ml鋼罐一套及研磨珠若干,液氮一升;
b,將樣品置于2ml鋼罐中,將其整個(gè)浸入液氮中5mins,然后安裝到上海凈信多樣品組織研磨儀上;
c,設置研磨參數:頻率為60hz,時(shí)間45s,啟動(dòng)設備進(jìn)行研磨;
d,待設備停止運行,取出研磨鋼罐。
e,打開(kāi)鋼罐往里加1ml提取液手動(dòng)混勻。再將樣品轉移至2ml離心管內,進(jìn)行后續實(shí)驗操作。
樣品處理結果:
樣品研磨前
樣品研磨后