在細胞觀(guān)察實(shí)驗中,常常需要找回之前觀(guān)察過(guò)的某個(gè)細胞。
常規方法:初步觀(guān)察找到感興趣的細胞,用記號筆在培養皿/板的底部畫(huà)個(gè)圈。下次再觀(guān)察的時(shí)候,根據記號,再在顯微鏡下尋找之前的細胞。
缺點(diǎn):
1.由于底部記號筆的標記,使得成像照片上有陰影;
2.想直接觀(guān)測目標細胞的免疫熒光結果,卻因為培養皿/板底部的顯微成像效果不理想,而無(wú)法得到好的免疫熒光成像。
現在分享一種好方法,讓大家輕松找回原來(lái)看過(guò)的細胞!
目的:找回之前觀(guān)察過(guò)的細胞
耗材:帶計數格培養皿(品牌:ibidi,總代:雷萌生物)
圖1 培養皿底部帶計數格坐標
圖2 培養皿底部計數格的示意圖
步驟:找到感興趣的細胞后,記下細胞的坐標信息(橫坐標是字母,縱坐標是數字),下次再觀(guān)察時(shí),根據坐標信息找到細胞的位置,即可繼續觀(guān)察同一個(gè)細胞。
拓展應用:
1.底部的計數格可直接用于細胞計數,計數細胞無(wú)需轉移到計數板了;
圖3 邊長(cháng)500微米的計數格
圖4 邊長(cháng)50微米的計數格
2.鎖定感興趣的細胞,直接在培養皿里做免疫熒光實(shí)驗
圖5 小鼠免疫熒光染色效果(使用ibidi 35毫米培養皿的實(shí)驗效果)
如何選擇不同規格的計數格培養皿/載玻片?
根據實(shí)驗目的來(lái)!
*指倒置熒光顯微鏡,共聚焦顯微鏡等顯微鏡
**使用玻璃底的產(chǎn)品還可以有配套的蓋子進(jìn)行DIC活細胞成像