想了解的傷口愈合插件嗎?看這里!
更新時(shí)間:2021-11-16 點(diǎn)擊次數:1008次
傷口愈合插件可以在藥物處理或者基因沉默/過(guò)表達后進(jìn)行細胞遷的分析。重要的是,未處理的對照組可以在同一個(gè)培養器皿里面接種,分析,共享同樣的培養液。和其他傷口形成技術(shù)不同,培養愈合插件適合2D侵襲實(shí)驗和共培養實(shí)驗,同時(shí)可以實(shí)驗兩種,三種甚至四種細胞類(lèi)型或者處理方式。
如何利用傷口愈合插件做一個(gè)傷口愈合、遷移實(shí)驗?典型的傷口愈合和遷移實(shí)驗的結果就是隨著(zhù)時(shí)間的變化細胞覆蓋面積(傷口閉合)的變化。進(jìn)行傷口愈合和遷移實(shí)驗是一個(gè)非常簡(jiǎn)單的操作:
1.在細胞單層間制造出一個(gè)物理傷口。
2.在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行拍照,或者進(jìn)行實(shí)時(shí)成像觀(guān)察細胞遷移到傷口的過(guò)程。
3.采用手動(dòng)或者自動(dòng)化軟件分析傷口閉合的速率,這就是典型的實(shí)驗結果。
由于特殊設計的底部,傷口愈合插件黏附在表面,阻礙了壁下任何細胞的生長(cháng)。移除培養插件后,新形成的無(wú)細胞傷口處沒(méi)有任何殘留。這種方法可以重復地形成高度一致的沒(méi)有任何細胞的傷口。當放置在平整,干凈的表面,培養插件2孔給培養的細胞提供了兩個(gè)儲液池,中間被500μm厚度的壁給分隔開(kāi)。細胞接種在儲液池中培養,一直到他們貼壁,形成單細胞層。移除表面的硅膠插件后會(huì )形成兩個(gè)精確大小的細胞斑塊,由一個(gè)大小和分割壁一樣寬度的區域所分開(kāi)。接著(zhù)就可以通過(guò)活細胞成像或者在不同時(shí)間點(diǎn)拍照來(lái)監測細胞遷移。